ТЕСТ-НАБОР для определения ингибирующих PIONEERPRODUKT® DASH-TEST, WC0040

02.07.2024
376

Тест-набор PIONEERPRODUKT® DASH-TEST

Артикул № WC0040

Введение

Тест-набор PIONEERPRODUKT® DASH-TEST– микробиологический тест для качественного обнаружения остаточных количеств антибиотиков и ингибирующих веществ в сыром (коровьем, козьем, овечьем), пастеризованном, стерилизованном и предварительно восстановленном сухом молоке.

 

ТЕСТ-НАБОР для определения ингибирующих PIONEERPRODUKT® DASH-TEST, WC0040

Принцип

Тест-набор PIONEERPRODUKT® DASH-TESTоснован на микробиологическом методе ингибирования. Лунки содержат среду со спорами Bacillus stearothermophilusи рН-индикатором. Во время культивирования при 65оС, споры прорастают, происходит рост бактерий и закисление среды. Значение рН уменьшается и индикатор изменяется с исходного фиолетового цвета на желтый. Если в пробе молока и молочных продуктов есть антибиотики или другие ингибирующие вещества, они будут подавлять рост бактерий, тем самым не будет вырабатываться кислота, индикатор не поменяет цвет и останется исходно фиолетового цвета. Если антибиотики или другие ингибирующие вещества присутствуют в молоке и молочных продуктах или их концентрация ниже предела обнаружения, споры прорастают, происходит рост бактерий, вырабатывается кислота и среда становится желтой.

 

Условия хранения

1. Температура хранения: 2-8 °С
2.Срок хранения: 18 месяцев с даты производства

 

Поставляемые реагенты и материалы

Отрывной блок с микролунками

1 блок (96 отдельных тестов в блоке)

Защитная пленка (алюминиевая фольга)

1

Инструкция

1

Колориметрическая карта

1

Отрицательный контроль (молоко без антибиотиков)

1

Положительный контроль (молоко, содержащее 4 мг/л Пенициллина G или 4 мг/л Ампициллина)

1

Дозатор (одноканальная микропипетка) на 100 мкл

1

Наконечники

100

 

Дополнительные необходимые материалы, которые не входят в состав набора

- Нагревательное оборудование со стабильным температурным режимом 65 оС (водяная баня или сухой нагревательный блок (термостат-инкубатор))

 

Подготовка отрицательного и положительного контрольных образцов для проведения контроля точности работы набора

Добавьте по 500 мкл деионизированной или дистиллированной воды во флаконы с отрицательным и положительным контролями, энергично перемешайте до полного растворения содержимого флаконов. Контрольные образцы готовы к использованию.

Внимание: контрольные образцы должны готовиться непосредственно перед использованием.

 

Процедура анализа

1. Аккуратно возьмите нужное количество микролунок, не повредив защитную пленку на оставшихся лунках. Микролунки следует выдержать при комнатной температуре в течение 15 минут. Остальные компоненты сразу же запечатайте. Компоненты должны хранится при температуре 2-8 °С.

2.Снимите защитную пленку на микролунках, внесите 100 мкл тестируемого образца в каждую лунку (Внимание: не перемешивайте содержимое пипетированием). Для проведения контроля точности работы набора параллельно вносят отрицательный и положительный контрольные образцы.

3. Закрыть защитной пленкой (алюминиевой фольгой) микролунки, поместить их вертикально на водяную банюили в термостат при температуре 65°Cи инкубировать при температуре (65±2) °С приблизительно от 2ч до 2ч 45мин (когда отрицательный контроль окрасится в желтый цвет).

Примечание: если необходимо определить чувствительность, отрицательный контроль можно использовать для определения точного времени культивирования. Процедура: инкубировать 2ч, после этого начать контролировать цвет отрицательного контроля. Рекомендуется наблюдать каждые 5 минут. Когда отрицательный контроль окрасится в желтый цвет, немедленно считать результаты всех оставшихся образцов.

4. После завершения реакции микролунки извлекают из водяной бани или термостата, определяют цвет их содержимого и получают результат:

- отрицательный результат: цвет среды ярко желтый или желтый

- положительный результат: цвет среды фиолетовый

Результаты пределов обнаружения: если цвет среды между желтым и фиолетовым или цвет не изменился (остается фиолетовым), это означает, что концентрация антибиотика или ингибирующего вещества находится в пределах обнаружения набора и результат должен считаться положительным.

 

Интерпретация результатов

Интерпретация результатов

Ярко желтый    Желто-фиолетовый   Фиолетовый

Отрицат. (-)   Предел обнаружения (+)  Полож.(++)

 

Меры предосторожности

1. Рекомендуется, использовать молоко без антибиотика в качестве отрицательного контроля и молоко, содержащее высокую концентрацию антибиотиков, в качестве положительного контроля для контроля точности работы набора.

2. Этот продукт является отрывным планшетом с микролунками. Взять необходимое кол-во микролунок, сперва отрезав защитнуюпленку(алюминиевуюфольгу)ножом вдоль разграничительной линии, аккуратно не повредив пленку на оставшихся лунках во избежание загрязнения и трещин на питательной среде. Остальные компоненты сразу же запечатайте. Компоненты должны хранится при температуре 2-8 °С.

3. Данный продукт не может напрямую определять кислотные вещества, например, йогурт.

4. Данный набор чувствителен к антибиотикам и другим бактериостатическим (ингибирующим) веществам (например, моющие средства, дезинфицирующие средства, консерванты). При проведении эксперимента избегайте загрязнением данными веществами. Необходимо мыть и тщательно вытирать руки перед проведением тестирования, проводить тестирование на чистой поверхности.

5. Сильно не встряхивать микропланшет, чтобы твердая среда не растряслась, иначе это повлияет на окончательный цвет.

6. Микропланшет хранить в вертикальном положении в темном месте и при постоянной температуре, желательно при температуре 2-8 °С. Не замораживать. Температурные колебания могут размягчить и разрыхлить среду. Слишком высокая температура приведет к сокращению срока годности.

7. Температура для инкубирования среды должна строго контролироваться при 65+2°С, если температура слишком высокая или слишком низкая, или есть температурные колебания, это повлияет на время реакции и чувствительность определения.

8. С помощью данного теста различный тип молочных продуктов тестируется разное количество времени (от 2ч до 2ч45мин).

9. По мере увеличения срока хранения, требуемое время культивирования возможно постепенно увеличиться. Реагенты с уже истекающим сроком годности время ингибирования должно быть увеличено и должно быть больше, чем для только что произведенных наборов, поэтому рекомендуется при использовании такого набора время инкубации должно быть связанно с моментом, когда отрицательный контроль станет желтого цвета.

10. Использованный микропланшет можно утилизировать после его стерилизации, например, под высоким давлением.

 

Чувствительность

См. приложение 1 информацию по пределам обнаружения и массовой доле.

 

Метод с использованием тест-набора PIONEERPRODUKT® DASH-TEST внесен в ГОСТ 31502-2012 «Молоко и молочные продукты. Микробиологические методы определения наличия антибиотиков» (с Изм. № 1, п. 5.3.1) и в ГОСТ 23454-2016 «Молоко. Методы определения ингибирующих веществ» (п. 9).

 

Приложение 1

Чувствительность

Антибиотик

Предел ЕС

Предел обнаружения

(мкг/л)

Бета лактамы

Пенициллин G(Бензилпенициллин)

4

2

Ампициллин

4

2

Амоксициллин

4

2

Нафциллин

30

10

Клоксациллин

30

20

Оксациллин

30

6-10

Диклоксациллин

30

10

Цефацетрил

125

20

Цефалексин

100

60-80

Цефалониум

20

10

Цефоперазон

50

25

Цефтиофур

100

50

Цефкином

20

75

Цефапирин

60

2.5-4

Цефазолин

50

10

Цефуроксим

50

30

Тетрациклины

Хлортетрациклин

100

100

Доксициклин

 

 

 

100

Окситетрациклин

100

100

Тетрациклин

100

100

Сульфониламиды

Сульфаметазин

 

 

 

Общие сульфонамиды/
сульфаниламиды:

100

25-50

Сульфадиметоксин

25-50

Сульфамеразин

100

Сульфатиазол

20

Сульфадиазин

50

Сульфадоксин

50

Сульфаметоксазол

<25

Сульфаметоксипиридазин

60-80

Сульфизоксазол

50

Сульфаклорпиридазин

25-50

Сульфафеназол

25-50

Сульфаметоксидиазин

50

Сульфабензамид

100

Сульфаклозин

100

Сульфапиразол

50

Сульфаметоксипиразин

25-50

Сульфизомидин

50

Сульфамонометоксин

50

Сульфапиридин

100

Сульфахиноксалин

50

Сульфаметазол

100

Сульфаметизол

80-100

Макролиды

Эритромицин

40

40

Спирамицин

200

400

Тилмкозин

50

50

Тилозин

50

20-25

Хинолоны

Ципрофлоксацин

100

1000-1500

Данофлоксацин

30

1000-2000

Марбофлоксацин

75

1000

Аминогликозиды

Гентамицин

100

100

Канамицин

150

2500

Неомицин

1500

200-300

Спектиномицин

200

>300

Стрептомицин

200

600

Дигидрострептомицин

200

700-1000

Остальные

Хлорамфеникол

 

2500

Рифаксимин

60

60-100

Пирлимицин

100

50

Тиамфеникол

50

1000

Триметоприм

50

100

Линкомицин

150

150

 

Этот препарат не предназначен для применения у животных, из молока которых производится молоко для потребления человеком.

Этот препарат запрещен.

Чувствительность

Ингибирующее вещество

Массовая доля  (%)

Активный хлор

0,12

Перекись водорода

0,02

Надуксусная кислота

0,01

Сульфонол

0,12

Формалин

0,003

 

 

Производитель:

Beijing Meizheng Bio-Tech Co., №-2 Building, №-8 Courtyard, Fenggusilu Road, Yanqing District, (Zhongguancun Yanqing Science Park), Beijing; China.

 

Вместе с этим читают: